このアイテムのアクセス数:65件（2025-08-14 05:03 集計）

閲覧可能ファイル 

ファイル フォーマット サイズ ダウンロード回数 説明
KJ00004283538 pdf 452 KB 125

基本情報

データ種別：学術成果リポジトリ

タイトル
The Use of 2, 3, 5-Triphenyltetrazolium Chloride in Assessing Leaf Protoplast Metabolic Activity
タイトルの別表記
TTC還元力による葉肉プロトプラスト代謝活性の評価
作成者
Watanabe, Masami
Watanabe, Yukio
Shimada, Noritsugu
作成者の別表記
渡辺, 正巳
嶋田, 典司
内容
葉肉プロトプラストのトリフェニルテトラゾリウムクロライド(TTC)還元力を測定することによって, プロトプラストの代謝活性を評価する方法を確立した.葉肉プロトプラストを0.05%リン酸緩衝液(pH7.4)に懸濁し, 16時間30℃, 暗黒下で培養した.不溶性のフォルマザンは80%のエタノールでプロトプラストから抽出し, 520nmの吸光度を測定した.ショ糖浮遊法で精製したナタネ葉肉プロトプラストはTTCを還元したが, 細胞の破片からなる画分はTTC還元力を示さなかった.ペチュニアの葉肉プロトプラストをN-メチル-N-ニトロ-N-ニトロソグアニジン(MNNG)で処理し, TTC還元力とコロニー形成率の関係を調べた.その結果, TTC還元力はMNNG濃度の増加とともに減少したが, コロニー形成率はMNNG濃度が25μg/mlに達すると急激に減少した.コロニー形成率はプロトプラストの活性を反映しているので, TTC還元力からプロトプラストの代謝活性を推定できるものと思われる.
The method of evaluating leaf protoplast metabolic activity by use of triphenyl tetrazolium chloride (TTC) has been established. The procedure for the TTC test is as follows: leaf protoplasts were isolated from Brassica napus cv. "Bronowski" and purified by floatation on 0.7M sucrose. The leaf protoplasts were suspended in 0.6M sorbitol-0.05M phosphate buffer (pH 7.4) containing 0.05% TTC and incubated in dark at 30℃ for 16 hours. Reduced water insoluble formazan was extracted from the protoplasts with 80 1.475460e-268thanol. Record the absorbance at 520nm. The purified protoplasts reduced TTC, whereas celluar or subcelluar debris gave negative TTC test. In order to estimate the relationship between TTC reduction rate and plating efficiency, leaf protoplasts of Petunia hybrida were treated with N-methyl-N'-nitro-nitrosoguanidine (MNNG). TTC reduction rate decreased with increasing concentration of MNNG, but the plating efficiency decreased conspicuously as MNNG concentration reached to 25μg/ml. Consequently, it could correlate with the plating efficiency. The TTC reduction test described here offers a simple test for prediction of leaf protoplast metabolic activity.
ハンドルURL
https://opac.ll.chiba-u.jp/da/curator/900026368/
フルテキストへのリンク
https://opac.ll.chiba-u.jp/da/curator/900026368/KJ00004283538.pdf
公開者
千葉大学園芸学部
NII資源タイプ
紀要論文
ISSN
0069-3227
NCID
AN00142658
掲載誌名
千葉大学園芸学部学術報告
巻
46
開始ページ
53
終了ページ
58
刊行年月
1992-03-25
著者版フラグ
publisher
カテゴリ
食と緑の科学